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本制品主要用于在非变性条件下从细胞和组织中提取可溶性蛋白，其裂解得到的蛋白样品尤其适用于免疫沉淀(IP)和免疫共沉淀(Co-IP)，也可以用于PAGE、Western Blot及ELISA等实验。本制品可以用于动植物细胞或组织样品，也可以用于真菌或细菌蛋白的提取，其裂解得到的蛋白样品可以使用百奥莱博BCA蛋白定量试剂盒测定浓度，不过由于其含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质，不能使用Bradford法进行蛋白定量。

• 裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
  
• 对于某些特殊蛋白，如果本制品裂解效果不理想，可以尝试使用RIPA裂解液(强、中、弱)。如免疫沉淀背景很高，即非特异的蛋白也被沉淀下来，需要选用裂解强度较高的裂解液，例如RIPA裂解液(强或中)。

• 取适当量的免疫沉淀裂解液(每1×10⁶个细胞需要约50～100μL或每20mg组织样本需要约150～250μL)，在使用前数分钟内将蛋白酶抑制剂按1:100(V/V)加入其中。
  
  如所需提取的为磷酸化蛋白，还需在裂解液中按1:100(V/V)加入磷酸酶抑制剂。
  
  
• 样本裂解(需在冰上操作)：
  
  • 对于贴壁细胞
    
    • 弃去培养基，用1×PBS(或生理盐水、无血清培养液)洗一遍(如果血清中的蛋白对实验没有干扰，也可以不洗)。
      
    • 尽可能地弃去PBS(多余的液体将降低裂解液的浓度)。
      
    • 按照每1×10⁶个细胞需要约50～100μL的比例加入免疫沉淀裂解液，比如6孔板每孔细胞量大约需加入150～250μL裂解液。用移液器吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1～2s后，细胞就会被裂解。
      
    • 将所有液体转入新的离心管中。
  • 对于悬浮细胞
    
    • 将细胞转移至离心管中，离心收集细胞，弃去培养基。
      
    • 用1×PBS(或生理盐水、无血清培养液)洗一遍(如果血清中的蛋白对实验没有干扰，也可以不洗)。
      
    • 尽可能的弃去PBS(多余的液体将降低裂解液的浓度)。
      
    • 按照每1×10⁶个细胞需要约50～100μL的比例加入免疫沉淀裂解液，比如6孔板每孔细胞量大约需加入150～250μL裂解液。用移液器吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必须分装成5×10⁵～1×10⁶个细胞/管，然后再裂解。
  • 对于细菌或酵母
    
    • 将菌液或酵母液转移至离心管中，离心弃去培养基。
      
    • 用1×PBS洗一遍。
      
    • 尽可能地弃去PBS (多余的液体将降低裂解液的浓度)。
      
    • 按照每1mL菌液或酵母液需要100～200μL的比例加入免疫沉淀裂解液，用移液器吹打数下，使裂解液和细胞充分接触，冰上裂解2～10min。如预先将细菌和酵母分别使用溶菌酶和破壁酶(Lyticase)进行消化，再使用本裂解液进行裂解，效果更佳。
  • 对于组织样品
    
    • 把组织剪切成细小的碎片。
      
    • 按照每20mg组织样本加入150～250μL裂解液的比例加入裂解液。
      
      如果样本裂解不充分，可以适当提高裂解液的用量；若需要高浓度的蛋白样品，也可适当降低裂解液的用量。
      
      
    • 用玻璃匀浆器匀浆，直至样本充分裂解。
      
      若组织样本非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液，通过强烈涡旋振荡使其裂解充分。
• 充分裂解后，10000～14000×g离心3～5min，小心地将上清液(蛋白样品)移入新的离心管中，即可进行后续的免疫(共)沉淀、PAGE、Western Blot及ELISA等操作。得到的蛋白样品可分装并长期保存于-80℃。